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        0.1mL 96孔PCR板使用指南
        更新時間:2025-09-19瀏覽:718次

          0.1mL 96孔PCR板使用指南

          1. ?耗材選擇與適配性?

          材質與規(guī)格?:選擇聚丙烯(PP)材質、0.1mL容積的96孔板,確保與熒光定量PCR儀(如ABI 7500fast、Roche 480等)的加熱模塊匹配?。

          顏色與裙邊?:

          透明板適用于底部光源儀器,乳白色板(如伯樂CFX系列)適合頂部熒光采集?。

          根據(jù)儀器需求選擇無裙邊、半裙邊或全裙邊設計,避免因邊緣凸起導致加熱不均?。

          2. ?實驗前準備?

          環(huán)境控制?:在超凈臺或生物安全柜中操作,紫外線消毒30分鐘以上,使用無核酸酶槍頭/離心管?。

          樣本布局?:優(yōu)先使用中間60孔(棄用邊緣孔),縱向排列樣本以減少熱蓋壓力不均影響?。

          3. ?加樣與密封?

          加樣技巧?:

          每孔反應體系10-20μL,采用反向移液法(高粘度樣本)或正向移液法(常規(guī)樣本),誤差控制在±1%內?。

          加樣后瞬時離心(1000rpm×10s)消除氣泡?。

          密封方法?:使用光學膜密封,先縱向壓膜,再橫向按壓邊緣,確保無漏液?。

          4. ?上機與擴增?

          儀器設置?:確認溫度、循環(huán)數(shù)、熒光采集參數(shù)與試劑盒說明書一致,注意是否需ROX參比染料?。

          耗材檢查?:避免使用普通PCR耗材(透光性差)或錯誤規(guī)格的板(如0.2mL板用于0.1mL模塊),防止熱傳導不均或假陰性?。

          5. ?常見問題與解決?

          擴增異常?:若曲線異常,檢查耗材質量(如封膜變形導致光學扭曲)、試劑有效期及凍融次數(shù)?。

          蒸發(fā)控制?:密封不嚴會導致ROX熒光上抬,需確保封膜緊密?。

          6. ?注意事項?

          一次性使用?:PCR板不可重復使用或剪開,避免交叉污染和實驗誤差?。

          存儲條件?:未開封試劑盒建議2-8℃保存,部分組分需-20℃避光?。

          注:以上僅供參考,科研使用,不作為實際數(shù)據(jù),實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。

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