小鼠左旋肉堿(L-Carnitine)ELISA試劑盒技術(shù)說明書

　　BS-9435 小鼠左旋肉堿(L-Carnitine)ELISA試劑盒

　　一、試劑盒組成

　　預(yù)包被板條：96孔微孔板，包抗小鼠L-Carnitine單克隆抗體

　　標(biāo)準(zhǔn)品：凍干粉(含已知濃度L-Carnitine，需復(fù)溶)

　　酶標(biāo)二抗：HRP標(biāo)記抗L-Carnitine多克隆抗體

　　顯色底物：TMB溶液(避光保存)

　　終止液：2M lusuan溶液

　　洗滌液：20×濃縮PBS緩沖液(需稀釋)

　　樣本稀釋液：專用緩沖液(減少基質(zhì)干擾)

　　二、樣本要求

　　血清/血漿：采集后離心(3000g，10min)，避免溶血

　　組織勻漿：按1:9比例加入PBS，冰浴勻漿后離心取上清

　　保存條件：-20℃短期存放，避免反復(fù)凍融

　　三、檢測流程

　　步驟操作條件

　　1. 加樣每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本(復(fù)溶后稀釋5倍)室溫避光

　　2. 溫育封板膜密封，37℃孵育60分鐘水平震蕩

　　3. 洗滌洗滌液注滿各孔，靜置30秒后拍干(重復(fù)5次)洗板機(jī)推薦

　　4. 加酶每孔加入100μL酶標(biāo)二抗37℃孵育30分鐘

　　5. 顯色加入TMB底物50μL，避光反應(yīng)15分鐘37℃

　　6. 終止加入50μL終止液，立即測定15分鐘內(nèi)完成

　　四、結(jié)果計算

　　酶標(biāo)儀：450nm讀取OD值

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線：四參數(shù)邏輯回歸(R2≥0.99)

　　樣本濃度：OD值對應(yīng)濃度×稀釋倍數(shù)

　　五、性能參數(shù)

　　檢測范圍：0.02-40 ng/mL(線性范圍)

　　靈敏度：低檢出限<0.02 ng/mL

　　特異性：與小鼠L-Carnitine交叉反應(yīng)率>95%，無心肌cTnI交叉反應(yīng)

　　精密度：批內(nèi)CV≤10%，批間CV≤15%

　　六、注意事項

　　試劑保存：未開封試劑2-8℃保存，開封后按有效期使用

　　操作規(guī)范：

　　移液器吸頭不可混用，避免交叉污染

　　顯色反應(yīng)需嚴(yán)格避光，避免氣泡干擾

　　質(zhì)控要求：

　　每板設(shè)置空白孔及雙復(fù)孔

　　樣本稀釋比例需預(yù)實驗優(yōu)化

　　廢棄物處理：含生物樣本的耗材需高壓滅菌后丟棄

　　七、適用儀器

　　酶標(biāo)儀(450nm波長)

　　洗板機(jī)(推薦使用)

　　備注：本說明書基于同類ELISA試劑盒通用規(guī)范編寫，具體參數(shù)以實際產(chǎn)品附帶資料為準(zhǔn)。

　　注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。

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